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台灣鋏蠓(小黑蚊)過敏臨床表徵、免疫機轉、過敏原分子選殖與鑑定之研究

為了解決小黑蚊 紅 疹的問題，作者陳怡行 這樣論述：

台灣鋏蠓(俗稱小黑蚊)是一種體型微小(1-1.5 mm)的吸血昆蟲,廣泛分佈於臺灣近郊及鄉間,中國大陸南方也有報告其蹤影。我們發現約60%曾被小黑蚊叮咬的民眾會對小黑蚊叮咬產生過敏反應且小黑蚊叮咬過敏有兩種臨床型態1)立即型：患者於叮咬1小時內產生局部大塊紅腫劇癢反應2)延遲型：患者於叮咬12至24小時後生劇癢之丘疹及水泡,甚至皮膚潰爛。此種延遲型皮膚過敏反應往往持續數週甚至數月方消，造成患者極大困擾。我們的研究分為兩大主軸：一為兩種台灣鋏蠓過敏反應的免疫機轉；二為鑑定與選殖台灣鋏蠓主要過敏原。我們發現，小黑蚊叮咬之立即型反應為IgE媒介之過敏反應, 且22-、24-、 35/36- 與 6

4-kDa之蛋白質為主要之過敏原。我們的研究也發現免疫球蛋白E非導致延遲型過敏反應之主要分子，Th1免疫反應之丙型干擾素及先天免疫反應之第六介白質與甲型腫瘤壞死因子均參與延遲型過敏反應，顯示Th1細胞免疫反應與台灣鋏蠓延遲型過敏反應可能比較有關。蛋白脢活化路徑(protease-activated pathway)可能也參與台灣鋏蠓叮咬過敏之免疫反應。我們用λZAP II 嗜菌體建立台灣鋏蠓之cDNA基因庫，並以病患血清或For t 2專一性抗體來篩選菌株。我們將與病患血清IgE或For t 2專一性抗體反應之選株次選殖至pET30或pQE30載體並以E. coli表現系統表現並及純化其重組過

敏原蛋白質。我們成功表現並純化一24kDa 融合重組過敏原(rFor t 1.0101)及一36kDa重組過敏原(rFor t 2.0101)。 rFor t 1.0101與67.8%之病患IgE 反應而rFor t 2.0101與75%之病患血清反應, 均符合主要過敏原之定義。rFor t 1.0101 與埃及斑蚊之serine/threonine protein kinase 有65.3%之序列相似性而rFor t 2.0101 序列與埃及斑蚊之eukaryotic translation initiation factor 3 subunit有77.9%之序列相似性。 雖然小黑蚊叮咬過敏

往往造成患者生活品質之極大困擾，目前卻沒有標準的檢驗方法可供確立診斷，除了請病患僅量避免被叮之外，也沒有積極有效之治療方式。我們選殖出兩個台灣鋏蠓之主要過敏原, rFor t 1.0101 及rFor t 2.0101，希望這些純化之台灣鋏蠓重組過敏原，將來可做為檢驗台灣鋏蠓過敏及皮膚試驗試劑之材料及穩定來源進而做為台灣鋏蠓過敏減敏治療疫苗之來源。